氨基酸阐发仪表面
发布时间:2019-08-07   动态浏览次数:

  全从动氨基酸阐发仪概况 上海仪先仪器无限公司 韩 春 上海仪先 一、氨基酸的定义 ? 什么是氨基酸,为什么阐发氨基酸? ? 地球上近150万种动物、30万种动物和20万种微生物虽然生 类如斯繁多,其外部形态、内部布局、糊口习性、繁殖体例千差 万别,但素质只要一个,即如恩格斯所说的: “生命是卵白体的存 正在体例,这种存正在体例的本色就是这些卵白体化学成分的不竭自 我更新”。 ? “卵白体的化学成分”就是构成卵白的根基单位-氨基酸,而 “不竭更新”就是氨基酸的不竭的从头陈列、组合。 上海仪先 一、氨基酸的定义 ? 要切磋和生命现象的发生、成长、灭亡、新陈代谢、遗传变异等 过程,即取生命相关的心理生化、医疗卫生、农业、畜牧业等就离不 开对氨基酸的阐发取研究。 ? 跟着科学的成长和社会的前进,很多相关的范畴,如医药、食物、资 源的开辟操纵、地质勘察,甚至考古、探秘等也需要氨基酸阐发。 ? 今天氨基酸已深切人们的出产取糊口,氨基酸阐发已成为产物开辟、 质量节制和出产办理的主要手段。 ? 氨基酸的布局式:R—CH—COOH NH2 上海仪先 二、氨基酸阐发的道理 ? 1958年 stein及moore两人先后发现离子互换分手、茚三酮 柱后衍生氨基酸从动阐发仪,1972年同获诺贝尔。 ? 柱上保留的氨基酸,因淋洗液的PH值、离子强度、柱温以及氨 基酸本身的性质分歧而使各类氨基酸得以分手,仪器通过切确 节制各类分手及衍生前提以定性定量反复性 上海仪先 二、氨基酸阐发的道理 ? 分手:阳离子互换柱,操纵氨基酸的pKa值的分歧,用柠 檬酸缓冲液分歧的pH的变化使氨基酸被一一淋洗下来。 酸性氨基酸羟基氨基酸中性氨基酸 芳喷鼻族氨基酸碱性氨基酸 ? 茚三酮反映道理 脯氨酸取茚三酮反映:波长440nm检测 O OH OH O COOH N H OO + N + 上海仪先 二、氨基酸阐发的道理 ? 茚三酮反映道理 其它氨基酸取茚三酮反映:波长570nm检测 O OH OH O O +R H CH NH2 O COOH OH +RCHO +CO +NH 2 3 O OH OH O 3 O O N O +NH +OH H O O O- 上海仪先 茚三酮取氨基酸的衍生反映 茚三酮 还原茚三酮 + O OH R OH O CH COOH NH2 OH + 伯胺型氨基酸 仲胺型氨基酸 O H 兰紫色化合物 黄绿色化合物 RCHO O CO2 NH3 水合茚三酮 还原茚三酮 O OH NH3 OH HO O O OH OH O O H O N O 伯 胺 型 仲 胺 型 O 兰紫色化合物 O O O N COOH N O H 黄绿色化合物 上海仪先 三、为什么要采用茚三酮柱后衍生法 ? 合适国标及国际仲裁尺度 ? 仪器从动化程度高 ? 衍生时间、衍生温度等无样品间差别,不变性、分辩率、 分手度具佳 ? 色谱柱寿命长 ? 单样成本低 从动化 衍生物 程度 不变性 柱前(液相) 柱后(公用仪) 柱子 前处置 阐发的氨 一次性 单样 寿命 过程 基酸品种 设备投入 成本 短 长 繁琐 简单 18-26种 40种以上 低 高 高 低 低 高 低 高 上海仪先 我国氨基酸检测的相关尺度 GB 7649-87 谷物籽粒氨基酸前处置方式 GB/T 15399-94 饲料含硫氨基酸测定方式 GB/T 15398-94 饲料无效赖氨酸测定方式 GB/T 15400-94 饲料色氨酸测定方式 GB/T 14965-94 食物中氨基酸测定 GB/T 5009.124-2003 食物中氨基酸测定 GB/T 18246-2000 饲猜中氨基酸的测定 GB/T 14924.10-2001 尝试动物共同饲料氨基酸测定 GB/T 8314-87 茶逛离氨基酸测定 GB/T 12292-1990 生果蔬菜汁逛离氨基酸测定 GB/T 17419-1998 含氨基酸叶面肥 NY/T 793-2004油料及其成品中氨基酸的测定高效液相色 谱法 上海仪先 四、产物布局和构成 上海仪先 四、产物布局和构成 溶液存放单位: 茚三酮、缓冲液、清洗液 低温储存 惰性气体 上海仪先 四、产物布局和构成 输液单位: 梯度系统、等度系统 脱气系统 上海仪先 四、产物布局和构成 反映检测单位: 反映柱(反映时间) 分光系统 上海仪先 四、产物布局和构成 从动进样单位: 从动清洗安拆 恒温存储 上海仪先 五、尝试室前提(水解阐发) 设备名称 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 试管浓缩仪(或其它浓缩设备) 实空泵 干燥箱 液氮罐 喷灯 喷灯用气(火机气) 涡流振荡器 抽滤瓶 冷冻安培瓶 浓缩管 500ml 20ml 50ml 用处简述 样品浓缩 浓缩或抽滤时利用 水解处置 样品烘干 溶液 水解处置,试管封口 水解处置,试管封口 溶液混匀 溶液过滤纯化 水解处置 充氮 样品浓缩 上海仪先 注:逛离氨基酸的阐发一般只需浓缩设备即可 六、阐发实例--啤酒酵母 钠盐系统(水解阐发系统) 上海仪先 六、阐发实例--猪排 钠盐系统(水解阐发系统) 上海仪先 六、阐发实例--一般血清 锂盐系统(体液阐发系统) 上海仪先 六、阐发实例--苯丙酮尿症血清 锂盐系统(体液阐发系统) 苯 丙 氨 酸 极 高 上海仪先 六、阐发实例--苹果汁 锂盐系统(体液阐发系统) 天 冬 酰 胺 及 天 冬 氨 酸 较 高 上海仪先 七、试剂耗损成本 ? 原拆成品试剂 :溶液全数颠末上机验证,可获得最佳阐发 结果,单样成本约20元人平易近币摆布。 ? 国产成品试剂 :溶液全数颠末上机验证,可获得较好阐发 结果,单样成本约15元人平易近币摆布。 ? 自配试剂(进口固体试剂):此方案的阐发结果取决于所用试 剂纯度及水的黑白,单样成本约8元人平易近币摆布。 ? 自配试剂(国产固体试剂):此方案的阐发结果取决于所用试 剂纯度及水的黑白,单样成本约3元人平易近币摆布。 上海仪先 八、出产商分布 一、日本日立公司: 835、8500、8800、8900 二、SYKAM公司 S433、S433D 二、英国Biochrom公司(原GE公司旗下) Biochrom 30 三、membraPure(原安米诺西斯 ) A200、A300 上海仪先 上海仪先

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